白桦BpGT14基因和启动子的克隆及功能分析

白桦BpGT14基因和启动子的克隆及功能分析

作者:

出版社: 科学出版社

CIP号:2017222226

书号:978-7-03-054437-7

出版地:北京

出版时间:2017.9

定价:¥68


简介

本书以白桦(BetulaplatypyllaSuk.)为材料,首先克隆了BpGT14基因,进行了生物信息和表达模式分析,揭示了其对非生物胁迫的响应机制。运用改良的SiteFinding-PCR方法克隆得到了白桦BpGT14基因ATG上游2169bp调控序列,并对其进行了元件分析。同时选取了其中含有启动子核心元件的1156bp序列构建了GUS及GFP植物瞬时表达载体,利用三亲杂交及农杆菌侵染的方法对启动子在烟草及白桦悬浮细胞中的启动模式进行了分析。利用酵母单杂交方法分别对启动子1156bp片段及MYBPLANT元件进行了互作候选蛋白的筛选,并通过转录因子与启动子元件共转化烟草的方法对其互作进行了验证。分别构建了白桦BpGT14基因的pBI121植物表达载体及pRNAi-GG干扰载体。利用农杆菌叶盘转化法,将pRNAi-GG-BpGT14干扰载体转化进入白桦,RNA干扰效率达到40%~84%。石蜡切片分析转基因白桦茎横截面结构变化发现木质部面积增加23%~47%,而韧皮部面积无明显变化,木质部导管横截面积增加了53%~183%;转基因组培白桦苗的表现型及抗逆性分析显示,BpGT14表达量的降低使得白桦组培苗的生根能力增强,特别是高盐环境下仍有较高生根能力。本书初步揭示了BpGT14基因在白桦生长发育中的功能及对环境适应的机制,为白桦的遗传改良奠定基础。

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